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Immunologie cellulaire

Nexelis possède une vaste expérience dans le développement d’analyses en immunologie cellulaire pour surveiller les cellules immunitaires au cours d’études précliniques ou cliniques pour l’évaluation de l’immunogénicité ou de l’efficacité des candidats, du stade précoce au stade avancé du développement.

Nos experts travaillent en étroite collaboration avec nos clients pour adapter, développer, qualifier et valider des essais spécifiques afin d’évaluer adéquatement les réponses immunitaires et le phénotypage cellulaire.

Cytométrie en flux

La cytométrie en flux fournit des informations détaillées sur les populations de cellules immunitaires en détectant l’expression de marqueurs cellulaires spécifiques. Cette technologie est également utilisée pour la coloration des cytokines (intracellulaires ou circulantes), pour déterminer l’incidence sur les voies de signalisation, l’apoptose, l’activité phagocytaire et oxydative et pour mesurer la prolifération et la viabilité cellulaires.

Différents cytomètres en flux sont offerts : Fortessa X20, BD FACS LSRII et BD FACS Canto II

Applications

  • Isolement et cryoconservation de cellules mononuclées du sang périphérique (PBMC)
  • Immunophénotypage (jusqu’à 18 couleurs)
  • Coloration intracellulaire de cytokines
    • Cytokines (ex., IFN-γ, IL-2, IL-13, IL-17, TNF-α)
    • Potentiel cytotoxique (ex., CD107a, granzymes, perforine)
    • Aide à la cellule B (ex., CD40L)
    • Profil mémoire (ex., CD45RA, CCR7, CD27, CD28)
  • Activation/stimulation des cellules T (ex., CD44, CD62L)
  • Points de contrôle immunitaires (ex., PD-1, LAG-3, Tim-3)
  • Cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps (ADCC)
  • Billes CBA (cell bead array)
  • Prolifération et viabilité (ex., CFSE, Ki67, Annexin)
  • Infiltration de cellules immunitaires

ELISpot (AID) (ImmunoSpot/FluoroSpot)

L’essai ELISpot (Enzyme-Linked ImmunoSpot) évalue la réponse de cellules immunitaires spécifiques à un certain stimulus en mesurant à la fois la fréquence quantitative des cellules qui répondent positivement et la caractérisation qualitative de la sécrétion de cytokines spécifiques ou d’autres molécules immunitaires par ces cellules. L’essai ELISpot est utilisé pour surveiller l’effet des immunothérapies sur l’immunité spécifique de l’antigène des lymphocytes B et T, ainsi que l’effet sur l’équilibre Th1/Th2.

La détection peut s’effectuer par champ clair ou par fluorescence.

Applications

  • Isolement et cryoconservation des PBMC
  • Réponse humorale (cellule B)
    • Détection des cellules sécrétrices d’anticorps totaux et spécifiques, IgG / IgA
    • Détection des lymphocytes B mémoire
  • Réponse immunitaire à médiation cellulaire (lymphocytes T)
    • Cytokines : Efficacité des vaccins (IFN-γ), Réponse immunitaire de qualité (Th1/Th2)
    • Perforine et granzyme B : Réponse des lymphocytes T cytotoxiques
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